Hoe houd ik de waarden van een kolom uniek in MySQL?

U wilt dat de S.No de primaire sleutel blijft en dat PCID + USERNAME uniek is, zo dicht bij wat Hammerite zei:

ALTER TABLE MyTable
    ADD PRIMARY KEY (`S.No`),
    ADD UNIQUE KEY `PCID_USER_uk` (`PCID`, `USERNAME`);